MM_FS_CNJ_0131 出口肉及肉制品中呋喃唑酮残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0131出口肉 肉制品 猪肉 呋喃唑酮 残留量 液相色谱法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0131

     出口肉及肉制品中呋喃唑酮残留量检验方法

1.适用范围

    本方法适用于出口冻猪分割肉中呋喃唑酮残留量的测定。

2.原理概要

    试样中的呋喃唑酮残留用二氯甲烷提取，浓缩提取液，用正己烷液-液萃取除去脂肪及其他杂质，离心，取下层清液供高效液相色谱仪测定，外标法定量。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    乙腈；

    二氯甲烷；

    正己烷；

    甲醇；

    无水硫酸钠：经650℃灼烧4h后，贮于密闭容器中备用；

    乙腈水溶液：乙腈-水(80＋20，V/V)；

    无水硫酸钠柱：6cm×1.8cm(id)，内装5cm高的无水硫酸钠；

    呋喃唑酮标准品：纯度≥99％；

    呋喃唑酮标准储备液：称取10.0mg呋喃唑酮，用乙腈水溶液溶解并稀释定容至50mL棕色容量瓶中，保存于冰箱中。该液1mL相当于200μg呋喃唑酮；

    呋喃唑酮标准工作液：准确吸取呋喃唑酮标准储备液0.5mL，用水稀释定容至100mL棕色容量瓶中。该液1mL相当于1.0μg呋喃唑酮。保存于冰箱中。

3.2.仪器

    高效液相色谱仪：配有紫外检测器；

    旋涡混匀器或超声波提取仪；

    离心机；

    k-D真空浓缩器；

    蒸发烧瓶：100mL；

    锥形瓶：100mL，具塞；

    离心管：5mL，具塞带刻度；

    微量进样器，25μL。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过2500件为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.3.抽样方法

    按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品，其总重量不少于2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。

    如每件中无小包装，或有小包装但每袋重量超过2kg者，则可用锋利刀(用酒精灭菌过)在抽出的包件中，每件割取不少于500g试样，混合后置清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的总量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。

4.4.试样制备

    从所取原始样品中取出部分有代表性样品，经高速组织捣碎机捣碎均匀，充分混匀。用四分法缩分出不少于500g试样，混匀，均分成两份。装入清洁容器内，加封后，标明标记。

4.5.试样保存

    将试样于－18℃以下冷冻保存。

注：在抽样及制样操作过程中必须防止样品受到污染或发生残留含量的变化。

5.过程简述

5.1.提取

    称取试样约10g(精确至0.01g)，于100mL锥形瓶中，加25mL二氯甲烷，在旋涡混匀器或超声波提取器上提取5min，提取液通过无水硫酸钠柱滤入100mL蒸发烧瓶中，继用25mL二氯甲烷重复提取二次，均通过无水硫酸钠柱滤入同一蒸发烧瓶中，用二氯甲烷淋洗无水硫酸钠柱，滤液经K-D浓缩器(50℃水浴)浓缩至干。

5.2.净化

    准确加入1.0mL乙腈水溶液溶解残渣，同时加入1mL正己烷混匀2min。溶液移入5mL离心管中，3000r/min离心2min后，用尖嘴吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加入1mL正己烷，混匀2min，离心，用吸管移去上层正己烷层，将下层清液用乙腈水溶液定容至1.0mL，供高效液相色谱测定。

5.3.测定

5.3.1.液相色谱条件

色谱柱：ODS-C₁₈柱，250mm×4.0mm(id)，粒度10μm；

流动相：乙腈-水(40＋60)，500mL溶液中加0.5mL磷酸(85％)；

流速：1.0mL/min；

检测波长：365nm；

柱温：室温；

进样量：20μL。

5.3.2.液相色谱测定

    根据样液中呋喃唑酮残留量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中呋喃唑酮响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样进行测定。在上述色谱条件下，呋喃唑酮保留时间约为6.0min。

5.4.空白试验

    除不加试样外，均按上述测定步骤进行。

6.结果计算

    用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中呋喃唑酮残留含量：

式中：X——试样中呋喃唑酮残留量，mg/kg；

h——样液中呋喃唑酮的峰高，mm；

h_s——标准工作溶液中呋喃唑酮的峰高，mm；

c——标准工作溶液中呋喃唑酮的浓度，μg/mL；

V——样液最终定容体积，mL；

m——称取的试样量，g。

注：计算结果需要扣除空白值。

7.低限、回收率的测定

7.1.测定低限

    本方法的测定低限为0.01mg/kg。

7.2.回收率

    回收率的实验数据：

呋喃唑酮的添加浓度在0.01mg/kg时，回收率为90.5％；

呋喃唑酮的添加浓度在0.03mg/kg时，回收率为92.2％；

呋喃唑酮的添加浓度在0.10mg/kg时，回收率为87.7％；

呋喃唑酮的添加浓度在0.30mg/kg时，回收率为96.1％；

呋喃唑酮的添加浓度在3.00mg/kg时，回收率为98.3％。

8.来源：

    SN  0530—1996