MM_FS_CNJ_0146 出口乳及乳制品中噻菌灵残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0146出口乳 乳制品 噻菌灵 残留量 荧光分光光度法

MM_FS_CNJ_0146

     出口乳及乳制品中噻菌灵残留量检验方法

1.适用范围

    本方法适用于出口鲜乳中噻菌灵残留量的检验。

2.原理概要

    用氢氧化钾皂化试样中的脂肪，用乙酸乙酯提取噻菌灵，再用盐酸溶液抽提乙酸乙酯提取液中噻菌灵。用荧光分光光度法测定，标准曲线法定量。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    氢氧化钾溶液：50%(m/V)水溶液；

    氢氧化钾溶液：0.05%(m/V)水溶液；

    盐酸溶液：0.1mol/L；

    乙酸乙酯；

    噻菌灵标准品：纯度≥99%；

    噻菌灵标准溶液：准确称取适量的噻菌灵标准品，用盐酸溶液配成浓度为0.100mg/mL的标准贮备液。根据需要再用盐酸溶液稀释成适当浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器

    荧光分光光度计；

    冷凝管；

    分液漏斗：125mL；

    锥形瓶：100mL，具磨口；

    电热水浴锅；

    容量瓶：10mL。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过5000瓶为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.3.抽样方法

    按规定的抽样瓶数随机抽取，在所取的样瓶上标明记号，及时送实验室。

4.4.试样制备

    将所取回的样瓶，充分混匀，分取约250mL作为试样。装入洁净的容器内，密封，标明标记。

4.5.试样保存

    将试样于－5℃以下保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.1.皂化

    称取试样10g(精确至0.1g)于锥形瓶中，加入7mL氢氧化钾溶液，接上冷凝管，在沸腾的水浴上回流皂化40min，取下，充分冷却。

5.2.提取

    将皂化液移入分液漏斗中，用10mL水洗涤锥形瓶，洗液并入同一分液漏斗。加入15mL乙酸乙酯，轻摇0.5min，静止分层。将水层转入另一分液漏斗，用15mL乙酸乙酯再提取一次，剧烈振摇1min，静止分层。合并乙酸乙酯提取液。

5.3.净化

    用20mL氢氧化钾溶液洗涤乙酸乙酯提取液，剧烈振摇1min，分层后，弃去水层。再加入20mL氢氧化钾溶液轻摇洗涤一次，弃去水层。用2×5mL盐酸溶液(0.1mol/L)提取乙酸乙酯层。合并盐酸提取液于10mL容量瓶中，并用盐酸溶液(0.1mol/L)定容。供荧光分光光度法测定。

5.4.测定

5.4.1.荧光分光光度法测定条件

    激发波长：307nm；发射波长：359nm。不同型号仪器，可根据实际情况调节，以获得最佳激发波长和发射波长。

5.4.2.标准曲线的绘制

    分别吸取0.2，0.5，1.0，5.0和10.0mL标准工作溶液至一组10mL容量瓶中，用盐酸溶液(0.1mol/L)定容，于荧光分光光度计上测定各荧光吸光度，以荧光吸光度对噻菌灵浓度绘制标准曲线。

5.4.3.样液测定

    取5.3中定容后的样液，于荧光分光光度计上测定样液的荧光强度。从标准曲线上查得样液中噻菌灵浓度。

5.5.空白试验

    除不加试样外，均按上述测定步骤进行。

6.结果计算

    按式(1)计算试样中噻菌灵的残留含量：

式中：X——试样中噻菌灵含量，mg/kg；

c——从标准曲线上查得的样液中噻菌灵的浓度，μg/mL；

V——定容后样液的体积，mL；

m——试样的重量，g。

注：计算结果需将空白值扣除。

7.测定低限、回收率

7.1.测定低限

    本方法的测定低限为0.02mg/kg。

7.2.回收率

    回收率的实验数据：

噻菌灵的添加浓度在0.02mg/kg时，回收率为102%；

噻菌灵的添加浓度在0.10mg/kg时，回收率为96.5%；

噻菌灵的添加浓度在0.50mg/kg时，回收率为99.6%。

8.来源：

    SN  0606—1996